茶樹α-tubulin基因的原核表達及其多克隆抗體的制備

根據茶樹α-微管蛋白(α-tubulin)的mRNA全長序列(GenBank登錄號DQ340766)設計引物 , 以RT-PCR方法擴增茶樹α-tubulin基因 , 將擴增產物克隆到原核表達載體pET-32a(+)上 , 并轉化至大腸桿菌BL21trxB(DE3)中 , 經異丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)誘導后以包涵體形式表達 。 以純化后的α-tubulin融合蛋白制備兔多克隆抗體 , 用Westernblot方法檢測抗體特異性 。 結果顯示α-tubulin蛋白以包涵體形式大量表達 , 以融合蛋白制備的抗體對茶樹體內的α-tubulin具有良好的特異性 。 【茶樹α-tubulin基因的原核表達及其多克隆抗體的制備】完成機構:安徽農業大學茶葉生物化學與生物技術教育部重點實驗室,安徽合肥230036

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