
(一)麥芽汁培養基的配制 1.培養基成分 新鮮麥芽汁一般為10-15波林 。2.配制方法 (1)用水將大麥或小麥洗凈,用水浸泡6-12h,置于15℃陰涼處發芽,上蓋紗布,每日早、中、晚淋水一次,待麥芽伸長至麥粒的兩倍時,讓其停止發芽,曬干或烘干,研磨成麥芽粉,貯存備用 。(2)取一份麥芽粉加四份水,在65℃水浴鍋中保溫3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如無藍色出現,即表示糖化完全) 。(3) 糖化液用4-6層紗布過濾,濾液如仍混濁,可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清,加水20 m1,調勻至生泡沫,倒入糖化液中,攪拌煮沸,再過濾) 。(4)用波美比重計檢測糖化液中糖濃度,將濾液用水稀釋到10-15波林,調pH至6.4 。如當地有啤酒廠,可用未經發酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,加水稀釋到10-15波林后使用 。(5)如配固體麥芽汁培養基時,加入2%瓊脂,加熱融化,補充失水 。(6)分裝、加塞、包扎 。(7)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min 。(二)馬鈴薯葡萄糖培養基的配制 1、培養基成分 馬鈴薯 20g 葡萄糖 2 g 瓊脂 1.5-2g 水 100ml 自然pH 2.配制方法 (1)配制20%馬鈴薯浸汁 取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000m1 。80℃浸泡lh,用紗布過濾,然后補足失水至所需體積 。100 Pa滅菌20 min 。即成20%馬鈴薯浸汁,貯存備用 。(2)配制時,按每100 m1馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,加熱煮沸后加入2g瓊脂,繼續加熱融化并補足失水 。(3)分裝、加塞、包扎 。(4)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min 。(三)豆芽汁葡萄糟培養基的配制 1.培養基成分 黃豆芽 10g 葡萄糖 5g 瓊脂 1.5-2g 水 100ml 自然pH 2.配制方法 (1)稱新鮮黃豆芽10g,置于燒杯中,再加入100 m1水,小火煮沸30 min,用紗布過濾,補足失水,即制成10%豆芽汁 。(2)配制時,按每100 m1 10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g瓊脂,繼續加熱融化,補足失水 。(3)分裝、加塞、包扎 。(4)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min 。(四)察氏(czapck)培養基的配制 1.培養基成分 蔗糖 3g NaN03 0.3g K2HP04 0.1g KCl 0.05g MgSO4·7H2O 0.05 g FeS04 0.001 g 瓊脂 1.5-2g 蒸餾水 100ml 自然pH 2.配制方法 (1)稱量及溶化 量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中,分別稱取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4 。依次逐一加入水中溶解 。按每100 ml培養基加入1ml 0.1%的FeS04溶液 。(2)定容 候藥品全部溶解后,將溶液倒入量筒中,加水至所需體積 。(3)加瓊脂 加入所需量瓊脂,加熱融化,補足失水 。(4)分裝、加塞、包扎 。(5)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min 。YPD培養基YPD 或YPED,:Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L),又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培養基,加入瓊脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)瓊脂培養基 用于酵母菌的培養 配方:1% Yeast Extract(酵母膏),2% Peptone(蛋白胨),2% Dextrose (glucose)(葡萄糖),若制固體培養基,加入2%瓊脂粉 配制方法: 1 溶解10gYeast Extract(酵母膏), 20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板加入20g瓊脂粉 2 高壓 121度 20min 3 加入100ml 10×Dextrose (glucose)(葡萄糖),(葡糖糖溶液滅菌后加入) 注:葡萄糖,yeast extract ,peptone溶液混合后在高溫下可能會發生化學反應,導致培養基成分變化,所以要分別滅菌后再混合 。YPEG:除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作為碳源外,其他成分同YPD
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